一、U50,488H对大鼠腹主动脉的舒张作用及其机制（论文文献综述）
田菲[1]（2017）在《激活κ阿片受体改善高脂血症大鼠血管内皮功能的作用及其机制》文中认为背景:高脂血症是动脉粥样硬化等多种心血管疾病的独立危险因素,内皮功能障碍在动脉粥样硬化病变形成之前即可出现,是动脉粥样硬化疾病的早期始动环节。在高脂血症导致的内皮功能障碍中,一氧化氮（nitric oxide,NO）的生成减少或灭活增加是一个重要因素。本课题组前期研究发现,κ阿片受体（κ-opioid receptor,κ-OR）激动剂U50,488H对肺血管环具有直接的舒张效应,其机制与κ-OR受体激动后刺激内皮生成NO增加有关。长期低氧状态下,大鼠肺动脉压力增高,血管内皮内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,e NOS）活性降低,凋亡增加,κ-OR激动剂U50,488H可通过保持e NOS活性和抗凋亡作用保护肺动脉内皮细胞,有效降低低氧条件下大鼠的肺动脉压力。激活κ-OR对高脂血症状态下血管内皮功能是否同样具有保护作用,如有保护效应,其机制如何,目前尚不清楚。本研究将利用高脂血症大鼠模型,观察κ-OR激动剂U50,488H对血管内皮功能的作用,并探讨其调节血管内皮功能的机制是否与激活e NOS有关。研究结果表明,激活κ-OR可通过Akt-e NOS信号通路增加NO生成,进而减轻血管内皮损伤,改善血管内皮功能,提示κ-OR可能是高脂血症血管内皮功能紊乱干预的有效靶点。目的:1.探讨激活κ-OR对高脂血症状态下血管内皮结构和功能的影响;2.若激活κ-OR能改善血管内皮结构与功能,探讨其相关分子机制。方法:1.整体实验雄性SD大鼠,体重200±20 g,分组处理如下:1)正常喂养组:正常饮食喂养;2)高脂喂养组:高脂饲料喂养;3)高脂喂养+生理盐水组;高脂喂养的同时,腹腔注射溶解药物的0.85%生理盐水0.3 ml,隔日给药;4)高脂喂养+κ-OR激动剂U50,488H组:高脂喂养的同时,腹腔注射1.25 mg/kg U50,488H,隔日给药;5)高脂喂养+κ-OR阻断剂nor-BNI组:高脂喂养的同时,腹腔注射2.0 mg/kg nor-BNI,隔日给药;6)高脂饲料+U50,488H+nor-BNI组:高脂喂养的同时,腹腔先注射2.0 mg/kg nor-BNI,10分钟后注射1.25 mg/kg U50,488H,隔日给药。正常饮食喂养或高脂喂养14周后用全自动生化分析仪检测总胆固醇（total cholesterol,TC）,甘油三酯（triglyceride,TG）,低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterin,LDL-C）,高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HLD-C）和血糖（blood glucose,Glu）。透射电镜检测主动脉内皮细胞和平滑肌细胞超微结构。分离血管环检测主动脉内皮功能。测定e NOS活性、诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,i NOS）活性与NO含量。Western blot检测主动脉Akt和e NOS表达与磷酸化,以及i NOS表达。2.细胞实验离体培养人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）,用软脂酸钠诱导模拟制作高脂血症细胞模型。分组如下:1)U50,488H处理组;2)U50,488H+κ-OR阻断剂nor-BNI处理组;3)U50,488H+PI3K阻断剂LY294002处理组;4)U50,488H+Akt阻断剂MK-0026处理组;5)U50,488H+e NOS阻断剂L-NAME,western blot检测内皮细胞κ-OR表达、Akt和e NOS的表达及其磷酸化表达、以及caspase-3表达。Griess法测定细胞培养液中NO含量。用软脂酸钠诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）模拟制作高脂血症模型,分组如下:1)U50,488H处理组;2)U50,488H+κ-OR si RNA处理组;3)U50,488H+Akt si RNA处理组,western-blot检测内皮细胞κ-OR表达、Akt和e NOS表达及其磷酸化表达、caspase-3表达、以及Bax与Bcl-2表达。结果:1.U50,488H对血糖血脂的影响。经过14周喂养后,与正常喂养组（normal diet,ND）相比,高脂喂养组（high fat diet,HFD）大鼠血清TC含量和LDL-C含量明显增高（TC:2.55±0.18 vs.1.50±0.08 mmol/L;LDL-C:0.36±0.02 vs.0.16±0.01 mmol/L,n=10,P<0.01）,而Glu、血清TG和HDL-C含量无明显变化。在高脂喂养的同时,给予生理盐水、κ-OR激动剂U50,488H、κ-OR阻断剂nor-BNI以及给予U50,488H+nor-BNI均不能对Glu和血脂造成明显影响。2.U50,488H对肝脏脂肪变性的影响。与正常喂养组大鼠相比,14周高脂喂养组大鼠肝脏呈现明显的脂肪变性。在高脂喂养的同时,给予生理盐水、κ-OR激动剂U50,488H、κ-OR阻断剂nor-BNI以及给予U50,488H+nor-BNI均不能对肝脏脂肪变性造成明显影响。3.U50,488H对血管内皮超微结构的改善作用。正常喂养组大鼠主动脉内弹力膜较为完整;高脂喂养组内皮细胞坏死变性,内弹力膜断裂,有增生的胶原纤维组织;高脂喂养+生理盐水组与单纯高脂喂养组内皮细胞形态无明显区别;高脂喂养+U50,488H组内弹力膜较为完整,内皮细胞增生,核大不规则,内皮下有胶原增生;高脂喂养+nor-BNI组与高脂喂养+生理盐水组内皮细胞形态无明显区别;高脂喂养给予U50,488H前给予nor-BNI可阻断U50,488H对内皮结构的改善作用。4.U50,488H对血管内皮功能的改善作用。高脂喂养组大鼠的主动脉血管环对内皮依赖性舒张剂（乙酰胆碱acetyl choline,ACh）的反应较正常喂养组明显降低,而高脂喂养+U50,488H组的主动脉血管环对ACh的反应与高脂喂养组相比显着提高,说明U50,488H可改善高脂诱导的主动脉内皮功能的损伤作用。高脂喂养给予U50,488H前,给予nor-BNI,可阻断U50,488H对血管内皮功能的改善作用。各组血管对非内皮依赖性舒张剂S-亚硝基N-乙酰青霉胺（SNAP）的反应无显着差异。5.U50,488H增加高脂血症大鼠血清NO生成。与正常喂养组大鼠相比,高脂喂养组大鼠血清NO生成无明显变化,而高脂喂养+U50,488H组血清NO生成明显增加。高脂喂养给予U50,488H前,给予nor-BNI,可阻断U50,488H增加NO生成的作用。6.U50,488H增加高脂血症大鼠主动脉Akt和e NOS磷酸化,减少i NOS表达。与正常喂养组大鼠相比,高脂喂养组大鼠主动脉Akt和e NOS磷酸化水平降低,i NOS表达水平升高。与高脂喂养组或高脂喂养+生理盐水组相比,高脂喂养+U50,488H组大鼠主动脉Akt和e NOS磷酸化水平明显增加,i NOS表达水平明显降低。高脂喂养给予U50,488H前,给予nor-BNI,可阻断U50,488H增加Akt和e NOS磷酸化及下调i NOS表达的作用。7.U50,488H增加高脂血症大鼠主动脉e NOS活性,抑制i NOS活性。与正常喂养组大鼠相比,高脂喂养组大鼠主动脉e NOS活性降低,i NOS活性升高。与高脂喂养组或高脂喂养+生理盐水组相比,高脂喂养+U50,488H组大鼠主动脉e NOS活性明显增加,i NOS活性明显降低。高脂喂养给予U50,488H前,给予nor-BNI,可阻断U50,488H增加e NOS活性及下调i NOS活性的作用。8.U50,488H通过κ-OR激活Akt-e NOS-NO途径减轻高脂诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡。与正常培养的HUVEC相比,高脂培养的内皮细胞κ-OR表达下调,Akt和e NOS磷酸化降低,NO生成减少,总的caspase-3和活性状态的caspase-3表达上调。高脂处理前给予U50,488H可上调κ-OR的表达,上调Akt和e NOS的磷酸化,增加NO生成,下调总的caspase-3和活性状态的caspase-3表达,U50,488H处理前给予nor-BNI可阻断U50,488H的上述效应。U50,488H处理前给予PI3K阻断剂LY294002或Akt阻断剂MK-0026不影响其对κ阿片受体的上调,但可阻断U50,488H上调Akt和e NOS的磷酸化、增加NO生成、下调总的caspase-3及活性状态的caspase-3表达的效应。U50,488H处理前给予e NOS阻断剂L-NAME可阻断U50,488H上调e NOS的磷酸化、增加NO生成、下调总的caspase-3及活性状态的caspase-3表达等效应。9.κ-OR与Akt的si RNA对κ-OR-Akt-e NOS抗凋亡信号通路的作用。与正常培养的HUVEC相比,高脂培养的内皮细胞κ-OR表达下调,Akt和e NOS磷酸化降低,总的caspase-3和活性状态的caspase-3（活化形式）表达上调,促凋亡蛋白Bax表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调。高脂处理前给予U50,488H可上调κ-OR的表达,上调Akt和e NOS的磷酸化,下调总的caspase-3和活性状态的caspase-3表达,下调促凋亡蛋白Bax,上调抗凋亡蛋白Bcl-2。U50,488H处理前给予κ-OR si RNA可下调κ-OR的表达,明显减弱U50,488H增加Akt与e NOS磷酸化的效应,以及U50,488H调节凋亡/抗凋亡蛋白的效应。U50,488H处理前给予Akt si RNA不影响κ-OR表达,但明显下调Akt与磷酸化Akt的表达,明显减弱U50,488H增加e NOS磷酸化和上调抗凋亡蛋白Bcl-2下调促凋亡蛋白Bax等效应。结论1.激活κ-OR无降脂作用,但可改善高脂血症大鼠的血管内皮超微结构和血管内皮功能;2.激活κ-OR可通过κ-OR-Akt-e NOS信号通路增加NO生成,减少高脂所致的内皮细胞凋亡,减轻血管内皮损伤;
罗斌[2]（2014）在《激动κ阿片受体对大鼠高原性肺水肿的防治作用及相关机理研究》文中进行了进一步梳理高原性肺水肿（high altitude pulmonary edema，HAPE）发病急、进展快、病情重，是一种重型急性高原病。而目前HAPE的预防和治疗的措施存在救治相对滞后和疗效不佳的困扰。近年的研究证实阿片受体激动剂对肺的缺氧缺血损伤以及低压低氧导致的肺动脉高压具有显着的防治作用。本研究利用大鼠HAPE模型，通过观察κ阿片受体激动剂预处理对HAPE大鼠血流动力学、氧化代谢与氧化应激水平、组织病理以及参与HAPE发病机制的相关因子，评价κ阿片受体激动剂用于HAPE防治的临床可行性及效果，并深入探讨其分子生物学作用机制，旨在探索HAPE防治的新途径。目的：运用动物低压低氧舱模拟高原环境，建立大鼠高原性肺水肿模型，观察κ阿片受体激动剂对高原性肺水肿的预防作用，并探讨和研究高原性肺水肿及其防治机制。方法：雄性SD大鼠40只，8周龄，体重250～300g，采用随机数字表法，将其分为5组（n=8）：对照组（C组）、低压低氧组（H组）、生理盐水+低压低氧组（NH组）、κ受体激动剂U50，488H+低压低氧组（UH组）、选择性κ受体拮抗剂nor-BNI+U50，488H+低压低氧组（NUH组）。大鼠置于低压低氧舱（大气压355mm Hg，氧分压74mm Hg）2d以制备高原性肺水肿模型。入舱前3d，NH组腹腔注射生理盐水0.5ml，UH组腹腔注射U50，488H1.25mg/kg，NUH组腹腔注射nor-BNI2.0mg/kg，10min以后立即腹腔注射U50，488H1.25mg/kg，均为每日1次。低压低氧处理2d后，测定平均肺动脉压（mPAP），取动脉血样，测定血清丙二醛（MDA）和促红细胞生成素（EPO）的水平；随后处死大鼠，取肺组织，计算肺含水量，测定肺组织一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、MDA、SOD、内皮素-1（ET-1）、血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1（6-keto-PGF1）的水平，并计算TXB2/6-keto-PGF1比值。结果：与C组比较，其余4组大鼠mPAP、肺含水量、肺组织ET-1、MDA、TXB2和6-keto-PGF1水平、TXB2/6-keto-PGF1比值、iNOS和血清MDA和EPO水平升高，肺组织NO、SOD水平降低（P<0.05）；与H组比较，UH组大鼠mPAP、肺含水量、肺组织ET-1、MDA、TXB2和6-keto-PGF1水平、TXB2/6-keto-PGF1比值、iNOS、和血清MDA和EPO水平降低，肺组织NO、SOD水平升高（P<0.05），NH组和NUH组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：激动κ阿片受体可对大鼠高原性肺水肿产生预防效果，其机制与抑制脂质过氧化反应和改善缩血管/舒张血管因子失衡有关。
张丽君[3]（2013）在《κ-阿片受体在低氧性肺动脉高压中的作用》文中进行了进一步梳理背景：低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary hypertension，HPH）是由于各种呼吸系统疾病引起的低氧血症导致的肺动脉高压。慢性阻塞性肺病（chronic obstructivepulmonary disease，COPD）以及长期处于高原环境均可导致HPH的发生。低氧引起的肺动脉收缩（hypoxic pulmonary vasoconstriction，HPV）和肺血管增殖重构（pulmonary artery remodeling，PAR）是HPH的两个重要病理生理环节。首先，低氧引起的肺动脉收缩本是机体的一种代偿反应，可促进肺泡的血流从低氧区流向高氧区，改善肺的通气/血流比值。然而，长期的低氧环境可引起肺动脉的持续不可逆收缩，导致肺动脉高压的形成。其次，低氧早期可伴有舒张因子（一氧化氮、前列腺素等）和收缩因子（内皮素、血管紧张素Ⅱ等）的失衡，引起内皮功能的失调，并逐渐引起肺动脉平滑肌细胞的增殖与肺动脉血管的重构，最终导致肺动脉高压和右心室肥厚。因此，舒张肺动脉、预防内皮功能失调和抑制平滑肌细胞的增殖是防治HPH的潜在策略。研究发现，内源性阿片肽（endogenous opioid peptide，EOP）及其受体在心肺血管系统发挥了重要的调节作用，κ-阿片受体（Kappa-opioid-receptor，κ-OR）是其中之一。本室前期研究发现，心肌缺血/再灌注后给予κ-阿片受体激动剂U50,488H可对抗心律失常的发生，减少心肌细胞坏死与凋亡，抑制再灌注后的炎症反应，对心肌发挥直接的保护作用，其机制与κ-OR介导激活PI3K-Akt-eNOS信号通路、增加NO生成有关。Akt-eNOS信号通路障碍是内皮功能失调的重要机制之一，然而，在HPH时，κ-OR能否通过介导激活Akt-eNOS信号通路，恢复肺动脉内皮功能，目前尚不清楚。另外，HPV和PAR是肺动脉高压形成的基本环节，前期研究发现，U50,488H对肺动脉具有明确的血管舒张效应，对肺动脉平滑肌细胞的增殖具有明确的抑制作用，但是这些作用在HPH是否存在？是否由κ-OR所介导也不清楚。本研究拟采用大鼠HPH模型，研究激活κ-OR能否对抗HPH，并进一步从改善内皮功能失调、舒张肺动脉血管和抑制肺动脉血管增殖等方面阐明κ-OR在抗HPH中的作用及可能机制。研究结果可为HPH的预防和治疗提供新的受体靶点，也为临床应用阿片类物质预防和治疗HPH提供实验依据，因而具有一定的理论和临床应用意义。目的：1.研究激活κ-OR在抗HPH中的作用。2.探讨激活κ-OR对HPH大鼠肺血管的舒张效应。3.探讨激活κ-OR对低氧引起的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响4.探讨激活κ-OR对HPH大鼠内皮功能失调的影响方法：1.模拟海拔5000～5500米气压环境（大气压50kPa,氧浓度约10%），通过低压低氧动物仓，构建HPH动物模型。在整体动物上观察κ-OR激动剂U50,488H与κ-OR阻断剂nor-BNI对HPH形成的影响。2.自大鼠右侧颈外静脉插入直径为1mm的聚乙烯塑料导管，沿上腔静脉进入右心房、再通过三尖瓣口进入右心室，最后到达肺动脉干。运用RM-6280多道智能生理信号采集和记录系统，测量大鼠平均肺动脉压（mPAP）和右心室压力（RVP）等肺血流动力学指标，并通过该系统分析以上指标。3.剖胸取出大鼠心脏，沿室间隔边缘分离出右心室（RV）和左心室以及室间隔（LV＋S），称重计算RV、LV+S，以RV/（LV+S）比值和RV/BW（体重）比值来反映右心室肥厚程度。Western blot法检测肺动脉上κ-OR的蛋白表达情况。ELISA试剂盒检测内源性的κ-OR激动剂强啡肽（DynorphinA）的变化。4.分离HPH大鼠肺动脉，采用离体血管灌流技术，观察κ-OR激动剂U50,488H与内源性的κ-OR激动剂强啡肽（Dynorphin A）对HPH大鼠肺动脉血管环的舒张作用。5.用3H-TdR掺入实验和细胞MTT活性检测，观察κ-OR激动剂U50,488H对低氧下培养的肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响。6.采用离体血管灌流技术检测HPH大鼠肺动脉对内皮依赖性舒血管物质ACh的反应及U50,488H腹腔注射对该反应的影响，7.用硝酸还原酶法检测血清NO水平的变化，并观察κ-OR阻断剂nor-BNI、PI3K抑制剂wortmannin、选择性Akt抑制剂AI以及非选择性NOS抑制剂L-NAME对U50,488H刺激NO生成作用的影响。8.建立肺微血管内皮细胞（PMVECs）的原代和传代培养。采用TUNEL法检测U50,488H对低氧时PMVECs凋亡情况的影响，同时应用Western blot法检测低氧环境下给予U50,488H后PMVECs中Akt和eNOS的磷酸化水平。结果：1.大鼠慢性低氧2W后形成稳定的HPH。血流动力学指标mPAP和RVP明显升高。隔天、低氧前10分钟腹腔注射κ-OR激动剂U50,488H（1.5mg/kg）、连续2周，可显着降低低氧两周大鼠的mPAP、RVP以及右心室肥厚指标（RV/（LV+S））和RV/BW，这些效应可被κ-OR阻断剂nor-BNI所阻断。2.慢性低氧可以上调肺动脉上κ-OR的表达，U50,488H可以进一步上调慢性低氧时肺动脉上κ-OR的表达，该作用可被κ-OR阻断剂nor-BNI所阻断。3.低氧1W和低氧2W均可上调大鼠血清中内源性κ-OR激动剂强啡肽（DynorphinA）的水平，而低氧4W后强啡肽（Dynorphin A）的水平回复至基线水平以下。4. U50,488H可呈浓度依赖性地舒张HPH大鼠的离体肺动脉，该作用可以被κ-OR阻断剂nor-BNI和非选择性NOS抑制剂L-NAME所阻断。强啡肽（DynorphinA）对HPH大鼠离体肺动脉亦具有显着的舒张作用，该作用可被κ-OR阻断剂nor-BNI所完全阻断。5. PASMCs在低氧条件下3H-TdR掺入量和MTT的OD值明显升高，而U50,488H可以明显降低低氧条件下培养的大鼠PASMCs的3H-TdR掺入量和MTT的OD值，该效应呈明显的浓度依赖性（10100μmol/L），且该作用可被κ-OR阻断剂nor-BNI所阻断。6. U50,488H可改善HPH大鼠对内皮依赖性血管舒张剂乙酰胆碱（ACh）的舒张效应。7. U50,488H可明显增加慢性低氧大鼠血清中NO的生成，该作用可被κ-OR阻断剂nor-BNI、PI3K抑制剂wortmannin、选择性Akt抑制剂AI以及非选择性NOS抑制剂L-NAME所阻断。8. U50,488H具有抗内皮细胞凋亡的作用，该作用可被κ-OR阻断剂nor-BNI、PI3K抑制剂wortmannin、选择性Akt抑制剂AI以及非选择性NOS抑制剂L-NAME所阻断。9. U50,488H可明显增加PMVECs中Akt和eNOS的磷酸化水平，该效应可被κ-OR阻断剂nor-BNI和PI3K抑制剂wortmannin所阻断。结论：1.激活κ-OR具有抗HPH的作用，低氧早期可刺激大鼠内源性阿片肽Dynorphin的释放，同时上调κ-OR的表达，这可能是机体的一种代偿反应，但尚需进一步确认。2. κ-OR介导的抗HPH的作用机制可能涉及舒张大鼠肺动脉、改善HPH大鼠肺动脉内皮细胞功能以及抑制低氧诱导的PASMCs过度增殖等。3.外源性给予U50,488H可进一步激活κ-OR，其一方面通过NOS途径发挥对HPH大鼠肺血管的舒张效应；另一方面，通过PI3K-Akt-eNOS信号通路改善HPH大鼠肺动脉内皮细胞功能。
裴建明,李娟[4]（2012）在《κ-阿片受体激动剂防治低氧性肺动脉高压的研究进展与展望》文中认为低氧性肺动脉高压（HPH）尚缺乏较为理想的治疗方法。预防内皮功能失调和抑制平滑肌细胞的增殖是防治HPH新的潜在策略。κ-阿片受体（κ-OR）激动剂U50、488H既可以内皮依赖性地舒张正常大鼠的肺动脉又可显着舒张HPH大鼠的肺动脉,其作用机制与电压依赖性钾通道（KV通道）及一氧化氮（NO）途径密切相关,预防性给予U50、488H可显着升高HPH大鼠血液及肺组织NO水平的同时,降低内皮素（ET）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度,显着改善低氧诱导的内皮功能失调,另一方面发现U50、488H能有效降低HPH大鼠的平均肺动脉压（mPAP）,并能明显减轻HPH大鼠的肺血管重建和右心室肥厚程度。另外,U50、488H可抑制低氧下的肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖,这可能是其抑制肺血管重建的原因,提示U50、488H对大鼠HPH具有明确的防治作用。U50、488H内皮依赖性的舒张肺动脉、降低肺动脉压、改善内皮功能失调及抑制PASMC增殖等作用均由κ-OR所介导,提示κ-OR有可能成为临床防治HPH新的药理学靶点。
时全星[5]（2012）在《U50488H对低氧性肺动脉高压内皮功能的改善作用及其机制研究》文中进行了进一步梳理【背景】肺动脉高压（PH）是临床上的一种严重的肺部血管疾病，其恶性程度高，目前被称为心血管疾病中的癌症，其主要表现为进行性肺血管阻力的增加和肺血管重塑。PH的治疗花费昂贵，致死率高，已成为目前亟待研究并予以解决的一项重大难题。迄今PH没有特效治愈方法，其治疗目标仅是延缓或者阻止病程进展。PH种类繁多，其中低氧性肺动脉高压（HPH）主要发生在有心肺疾病的患者和生活在高海拔地区的居民和官兵，在我国有大约6000～8000万人口居住在海拔2500m以上的地区，因此对HPH的研究得到越来越多学者的关注，而深入研究HPH的发病机制以及探索有效的防治措施对居民的健康和保障部队的战斗力具有重要的意义。HPH是一种进展性血管病。低氧引起的血管内皮损伤被认为是HPH的起始环节。在HPH的早期阶段，低氧引起血管损伤，主要表现为血管收缩因子和舒张因子平衡失调，血管舒张因子NO减少，而收缩因子增加。若在可逆性阶段给予干预，阻止NO减少，进而有望改善内皮功能，最终阻止疾病的进展。课题组近年来对阿片受体在心肺血管保护方面做了大量的研究。前期结果发现：κ-阿片受体激动剂U50488H对HPH大鼠离体肺动脉环具有舒张作用，并且此作用与NO密切相关。那么，U50488H是否能够改善HPH大鼠的肺动脉内皮功能？其作用机制如何？尚不清楚。此外U50488H能否改善低氧引起的内皮细胞凋亡，也未见报道。本研究分别在整体和细胞水平研究U50488H对HPH大鼠肺动脉内皮功能的影响及内皮细胞凋亡的影响，以期阐明阿片受体激动剂对内皮功能的改善作用及其机制，研究结果可为临床应用阿片类物质预防和治疗HPH提供理论支持，具有重要的理论意义和临床应用前景。【目的】本研究旨在研究U50488H能否改善HPH大鼠肺动脉内皮功能，并探讨其具体机制。此外在细胞模型上观察U50488H能否减少低氧导致的内皮细胞凋亡。【方法】（1）健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（180200g）随机分组，分组情况如下：正常组（常氧组）；低氧2周组；低氧2周+生理盐水组；低氧2周+U50488H （1.25mg/kg）组；低氧2周+U50488H （1.25mg/kg）+nor-BNI （2.0mg/kg）组；低氧2周+nor-BNI （2.0mg/kg）组。将各组大鼠置于自制的低压低氧舱，每天低氧8h，连续低氧2周建立HPH模型。实验结束后，于右侧颈静脉插管经右心房进入右心室测量右室压。血流动力学测量结束时经右侧颈静脉插管内取血，按照后续实验目的和要求留取肺、肺动脉、心脏等组织标本。（2）采用离体血管条灌流技术检测肺动脉血管内皮功能。（3）采用硝酸还原酶法检测血清NO水平。（4）应用Western blotting技术检测大鼠肺动脉p-Akt、Akt、p-eNOS、eNOS、iNOS和gp91phox的表达情况。（5）应用NOS活性分析试剂盒检测大鼠肺动脉eNOS和iNOS活性。（6）应用总抗氧化活性分析试剂盒检测大鼠肺动脉总抗氧化活性（T-AOC）。（7）建立肺微血管内皮细胞（PMVECs）的原代和传代培养。采用TUNEL法检测U50488H对低氧时PMVECs凋亡情况的影响。【结果】（1） κ-阿片受体激动剂U50488H对HPH大鼠肺动脉内皮功能的影响慢性低氧2周时，大鼠形成明显的HPH，此时肺动脉内皮功能受损，表现为肺动脉对内皮依赖性血管舒张剂ACh舒张反应减弱，而对非内皮依赖性血管舒张剂NaNO2却有正常的舒张反应。在低氧2周的同时腹腔注射U50488H（1.25mg/kg）可显着降低HPH大鼠右室压（RVP）和右室肥厚指数（RVHI），并可显着改善肺动脉对ACh的舒张反应。慢性低氧2周大鼠血清NO水平显着下降，而U50488H可显着升高血清NO水平。上述实验结果可被κ-阿片受体选择性阻断剂nor-BNI所阻断。结果提示，U50488H可通过激动κ-阿片受体改善HPH大鼠肺动脉内皮功能，并且同时能够升高血清NO的水平。（2） U50488H对肺动脉NO生成的影响慢性低氧2周时，大鼠肺动脉eNOS活性水平显着降低，iNOS活性显着升高，U50488H可升高HPH大鼠肺动脉eNOS活性并且降低iNOS活性。此外，慢性低氧2周时大鼠肺动脉eNOS磷酸化水平显着降低，U50488H可提高其磷酸化水平但未检测出其对Akt表达和磷酸化的影响。上述实验结果可被κ-阿片受体选择性阻断剂nor-BNI所阻断。表明U50488H可通过激动κ-阿片受体提高eNOS的活性和磷酸化水平进而促进NO的生成，该作用可能不依赖于Akt的磷酸化。（3） U50488H对肺动脉NO破坏的影响慢性低氧2周时，大鼠肺动脉总抗氧化活性（T-AOC）显着降低，预防性的给予U50488H可以显着升高大鼠肺动脉T-AOC。此外U50488H还可降低HPH大鼠肺动脉gp91phox的过表达。上述实验结果可被κ-阿片受体选择性阻断剂nor-BNI所阻断。表明U50488H可通过激动κ-阿片受体具有抗氧化和抗硝基化效应并可阻止NO的破坏。（4） U50488H对低氧引起的PMVECs凋亡的影响U50488H可显着抑制低氧诱导的PMVECs的凋亡，该作用可被κ-阿片受体阻断剂nor-BNI以及eNOS抑制剂L-NAME所阻断，表明U50488H通过激动κ-阿片受体产生的抗PMVECs凋亡作用与NO途径有关。【结论】（1）本研究首次发现κ-阿片受体激动剂U50488H可能通过促进NO生成，阻止NO破坏发挥其抗氧化/抗硝基化作用来改善HPH大鼠内皮功能。一方面U50488H可通过激活κ-阿片受体提高eNOS的活性和磷酸化以及抑制iNOS的活性，从而促进有生物活性的NO生成。另一方面，U50488H可能通过激活κ-阿片受体增加HPH大鼠肺动脉抗氧化物的活性、抑制超氧化物的生成，来减少NO的破坏。（2） κ-阿片受体激动剂U50488H可以抗低氧引起的PMVECs凋亡，该作用可能与NO途径密切相关。
李书凯,李娟,孙新,翟蒙恩,时歆,张丙芳,裴建明[6]（2011）在《κ-阿片肽与一氧化氮在低氧性肺动脉高压大鼠血管内皮功能中作用的研究进展》文中进行了进一步梳理低氧性肺动脉高压（HPH）是慢性阻塞性肺病、慢性高原病和新生儿肺病等临床众多心、肺疾病发病的关键环节。我们前期研究证明了κ-阿片肽能够防治HPH。越来越多的证据显示:NO途径参与了HPH的发生和发展。本文结合我们前期研究就NO信号途径在κ-阿片受体介导的抗HPH的可能作用机制作一综述,可为认识防治HPH提供新的学术见解。
单怡[7]（2010）在《κ阿片受体在复苏大鼠心肌中的表达及其对心功能的影响》文中认为了解κ阿片受体（κ-OR）在心搏停止（CA）和心肺复苏（CPR）心肌中的表达规律,探讨κ-OR对复苏后心功能的影响,为治疗复苏后心功能障碍提供理论依据。建立窒息致CA/CPR大鼠模型,分别测定窒息5、6、7min后进行CPR的大鼠心肌中κ-OR基因和蛋白表达水平；分别测定窒息7min后使用肾上腺素、肾上腺素联合参附复苏的大鼠心肌中κ-OR基因与蛋白表达水平。同时监测复苏大鼠HR、MAP、dP/dt40、LVEDP和-dP/dtmax等血流动力学参数,探讨复苏后心肌中κ-OR动态变化与心功能间的关系。建立大鼠离体心脏缺血再灌注（I/R）模型,观察在I/R不同时相应用κ-OR激动剂pentazocine后HR、dP/dtmax、LVDP和-dP/dtmax等血流动力学参数的变化及I/R后室性心律失常的发生频率。结果表明,复苏大鼠心肌中κ-OR的基因和蛋白表达水平较正常增高,κ-OR的保护性上调与复苏后心功能障碍的发生发展密切相关；κ-OR激动剂对复苏后心功能有保护作用,在缺血早期激活κ-OR心肌保护作用更好。
王伟光[8]（2010）在《к阿片受体通过抑制β肾上腺素受体途径调节Cx43发挥抗心律失常的作用及机制研究》文中指出心脏主要存在三种阿片受体亚型,即μ阿片受体、δ阿片受体和κ阿片受体,其中κ阿片受体亚型占主导地位。大量实验证实,心脏阿片受体激动后可降低心肌收缩力,舒张血管,在体、离体的研究都发现激动心脏阿片受体具有抗缺血/再灌注性室性心律失常的作用。在心律失常发生过程中,缝隙连接的结构和功能的改变发挥了重要的作用,而Cx43作为主要的缝隙连接蛋白,其功能和结构变化和心律失常的发生密切相关。以往的研究表明κ阿片受体选择性激动剂U50,488H通过激活心脏κ阿片受体能够显着抑制心肌缺血/再灌注导致的心律失常。其机制涉及到对交感神经系统、β肾上腺素受体系统等具有广泛的抑制作用。阿片类物质及其受体是否可能通过抑制心肌β肾上腺素受体及其受体后的传导通路,进而改善Cx43的重塑过程,从而抑制缺血引起的缝隙连接的脱偶联现象,最终抑制因缺血导致的心律失常,迄今未见报道。本文应用选择性κ阿片受体激动剂U50,488H和β肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素,重点研究激动心脏κ阿片受体和β肾上腺素受体后对正常心肌组织和缺血/再灌注心肌组织细胞缝隙连接蛋白Cx43基因和蛋白表达的影响,着重观察κ阿片受体激动后对Cx43的调节作用,以深入探讨κ阿片受体激动剂抗缺血/再灌注性心律失常的机制。主要研究内容:1.以正常SD大鼠心肌组织为研究对象,观察心脏κ阿片受体和β肾上腺素受体激动后对Cx43基因和蛋白表达的影响。2.建立大鼠心脏缺血/再灌注模型,观察心脏κ阿片受体和β肾上腺素受体激动后对缺血/再灌注心律失常发生率和对Cx43基因和蛋白表达的影响。方法:1.实验动物采用清洁级成年雄性SD大鼠,体质量250±20g,按随机原则进行实验分组。实验一大鼠麻醉后除股静脉给药外不做任何其它处理。实验二通过建立大鼠心脏缺血/再灌注动物模型并股静脉给药,缺血30分钟后再灌注120分钟。两组实验均同时记录大鼠心电图,实验结束后,打开胸腔,剪取左心室心肌组织或左心室缺血/再灌注心肌组织并按不同实验要求保存。2.运用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测大鼠心肌组织中Cx43mRNA的表达水平。3.运用免疫组织化学技术检测在大鼠心肌组织中Cx43总蛋白和磷酸化Cx43蛋白的表达情况。主要结果:实验一1.Cx43mRNA水平:与对照组相比,异丙肾上腺素可以提高正常心肌组织Cx43mRNA的表达（p<0.05）,而普萘洛尔和U50,488H则抑制异丙肾上腺素导致的Cx43mRNA的提高（p<0.05）。2.Cx43的分布特征:各组Cx43均分布于闰盘处,Cx43总蛋白相比较无统计学差异。与对照组比较,给予异丙肾上腺素后磷酸化Cx43降低（p<0.05）,而普萘洛尔和U50,488H则抑制异丙肾上腺素导致的磷酸化Cx43降低（p<0.05）。实验二1.心律失常评分:其他各组均明显高于对照组（p<0.05）,ISO+I/R组明显高于I/R组（p<0.05）,在ISO前给予U50,488H则可以降低ISO引起的心律失常（p<0.05）,其效应可被Nor-BNI阻断。2.Cx43mRNA水平:I/R组明显低于对照组（p<0.05）,ISO+I/R组比I/R组略增高（p>0.05）,在ISO前给予U50,488H则可使基因表达水平明显降低（p<0.05）,其效应可被Nor-BNI阻断。3.Cx43的分布特征:I/R组总Cx43及磷酸化Cx43（P-Cx43）均明显低于对照组（p<0.05）,ISO+I/R组总Cx43高于I/R组（p<0.05）,P-Cx43降低但与I/R组比较无统计学差异,给予U50,488H后,可明显提高总Cx43和P-Cx43表达量（p<0.05）,其效应可被Nor-BNI阻断。结论:1.通过对正常心肌组织研究发现,异丙肾上腺素可以提高Cx43mRNA的表达水平,其效应可以被普萘洛尔和κ阿片受体激动剂U50,488H阻断,并且普萘洛尔和U50,488H可以抑制异丙肾上腺素导致的磷酸化Cx43降低。表明U50,488H可以通过调节异丙肾上腺素进而影响Cx43功能。2.通过对大鼠心肌缺血/再灌注模型研究发现,κ阿片受体激动剂U50,488H抑制心律失常的发生,其机制是通过调节异丙肾上腺素进而影响Cx43功能来实现的。
周萱[9]（2010）在《κ阿片受体在糖尿病大鼠血管病变中的作用及其相关机制的研究》文中研究表明糖尿病（DM）已被世界卫生组织（WHO）确认为21世纪人类健康的主要杀手之一,其并发症多,危害大。其中DM血管病变在大血管和微血管均可发生,可导致临床肢体缺血性疾病和终末器官衰竭,严重影响了患者的生活质量,是糖尿病病人致死、致残的主要原因。内皮功能损伤以血管舒缩功能紊乱为主要表现,是DM血管病变的早期标志和独立的心血管危险因素。内源性阿片肽（EOPs）主要包括脑啡肽、内啡肽和强啡肽三大家族,其对应的受体分别为δ受体、μ受体和κ受体。研究已证实,EOPs及其受体在心血管系统大量存在,且心脏可以合成和释放阿片肽类物质,提示EOPs及阿片受体在调节心血管功能方面起着非常重要的作用。κ阿片受体（KOR）是心血管系统中阿片受体的主要亚型,其改变是引起心血管病变的可能因素之一。各种病因引起的心力衰竭均有显着的KOR表达减少,阿片依赖性的调节功能和心血管保护功能下降。激动KOR对缺血性心脏病、高血压和肺动脉高压等疾病均有有益的防治作用。然而目前关于KOR在DM血管病变中作用的相关研究报道较少。本研究旨在观察KOR选择性激动剂U50,488H和选择性阻断剂nor-BNI对链脲佐菌素诱导的DM大鼠肠系膜小动脉血管舒缩功能和主动脉结构的影响,检测KOR的表达变化,并初步探讨其作用机制,为防治DM血管病变提供新的理论基础和潜在治疗策略。目的:1.观察DM大鼠动脉组织上KOR的表达变化。2.观察KOR选择性激动剂U50,488H和选择性阻断剂nor-BNI对其表达的影响。3.观察激动或抑制KOR对DM大鼠肠系膜小动脉血管舒缩功能的影响。4.观察激动或抑制KOR对DM大鼠主动脉结构的影响。5.观察激动或抑制KOR对DM大鼠相关血管活性因子表达的影响。6.观察激动或抑制KOR对DM大鼠相关炎性因子表达的影响。方法:1.采用腹腔注射STZ（50 mg/kg）方法建立糖尿病大鼠模型。2.免疫组化方法检测主动脉血管组织中KOR表达的变化。3. Western blot方法检测肠系膜小动脉血管组织中KOR表达的变化。4.离体动脉血管环技术观察肠系膜小动脉血管舒缩功能的改变。5. HE染色及电子显微镜技术观察主动脉结构的变化。6. ELISA方法检测血清中AngⅡ及sICAM-1含量的变化。7. Western blot方法检测肠系膜小动脉血管组织中eNOS及NF-κB表达的变化。结果:1.大鼠主动脉上有KOR的表达,KOR主要分布在主动脉内膜上。2.与正常大鼠相比,DM大鼠主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR表达增加,腹腔注射KOR选择性激动剂U50,488H（1.0 mg/kg,1次/日,连续10日）可进一步上调主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR的表达;而腹腔注射KOR选择性阻断剂nor-BNI（0.5 mg/kg,1次/日,连续10日）则下调了主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR的表达。3.与正常大鼠相比,DM大鼠肠系膜小动脉舒缩功能发生紊乱,血管环对KCl和NE引起的收缩反应均显着增强（p < 0.05）,对ACh引起的内皮依赖性舒张反应显着减弱（p < 0.05）,对SNP引起的非内皮依赖性舒张反应无明显变化;肠系膜小动脉组织中eNOS表达减少而NF-κB表达增加（p < 0.01）;血清AngⅡ水平和血清sICAM-1水平均升高（p < 0.01）;HE染色光镜观察主动脉可见:内、中膜增生,平滑肌细胞排列紊乱,胶原纤维增生,内弹力板局部厚薄不均,排列紊乱,有断裂分离现象;电子显微镜技术观察主动脉超微结构可见:内皮细胞肿胀、坏死甚至脱落,平滑肌细胞增生、肥大,向内膜下层迁移,胞外胶原纤维不规则增生,弹性纤维层不规则增厚。4. U50,488H可使DM大鼠肠系膜小动脉舒缩功能得到明显改善（p < 0.05）,肠系膜小动脉组织中eNOS表达增加而NF-κB表达减少（p < 0.01）,血清AngⅡ水平和血清sICAM-1水平均降低（p < 0.01）,主动脉的结构紊乱得到改善。5. nor-BNI处理则使DM大鼠肠系膜小动脉舒缩功能进一步恶化（p <0.05）,肠系膜小动脉组织中eNOS表达进一步减少而NF-κB表达进一步增加（p < 0.01）,血清AngⅡ水平和血清sICAM-1水平进一步升高（p < 0.01）,主动脉的结构紊乱进一步加重。结论:1.大鼠主动脉上有KOR的表达,KOR主要分布在主动脉内膜上。2. DM大鼠主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR的表达较正常大鼠明显增加,而KOR选择性激动剂U50,488H可进一步上调KOR的表达,KOR选择性阻断剂nor-BNI则下调了KOR的表达。3.激动KOR可改善DM大鼠肠系膜小动脉血管舒缩功能和主动脉结构;其机制可能包括:①增加eNOS表达,下调AngⅡ水平,从而改善内皮功能;②抑制NF-κB表达,降低sICAM-1水平,从而降低炎症水平。本研究结果为进一步研究KOR介导的DM血管病变治疗提供了潜在的治疗策略和理论依据。
李娟[10]（2008）在《低氧时肺动脉上κ-阿片受体的变化及其抗增殖作用》文中认为慢性阻塞性肺病（COPD）等呼吸系统疾病以及长期高原环境生活等原因均可导致低氧性肺动脉高压（HPH）。HPH是临床众多心、肺疾病发生、发展过程中重要的病理生理环节,但是其形成机制尚不完全清楚,而且目前仍缺乏较为理想的治疗方法。无论如何,所有的低氧途径都导致血管内皮细胞和平滑肌细胞的重建从而导致血管内皮和平滑肌功能的改变。大家都知道平滑肌细胞的增殖是HPH的发病机制的关键过程。因此,抑制平滑肌的增殖是防治HPH的潜在策略。自Martin和他的同事首次发现κ-OR以来,人们逐渐在脑、脊髓及外周,包括血管系统发现有κ-OR的存在。放射免疫竞争结合测定和功能研究证明κ-OR是分布在外周血管的主要受体类型。内源性阿片肽在调节心血管功能方面起着非常重要的作用。我们以前的研究表明κ-OR特异性激动剂U50, 488H可舒张主动脉,降低体循环压力。另外我们前期的研究证明U50, 488H可舒张大鼠肺动脉,降低大鼠肺动脉压,表明肺动脉上可能存在κ-OR,然而κ-OR在肺动脉和PASMCs上是如何分布的,以及低氧对肺动脉上κ-OR的表达的影响迄今未见报道。因此,本课题重点研究低氧和U50, 488H对肺动脉及PASMCs上κ-OR的表达的影响,并研究激动κ-OR是否发挥对抗PASMCs增殖和对抗血管重建的作用?研究结果可为阿片类物质防治HPH提供理论依据。目的1.研究正常成年大鼠肺动脉上是否有κ-OR的表达。2.研究低氧和U50,488H对大鼠肺动脉上κ-OR表达的影响。3.研究低氧和U50,488H对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）上κ-OR表达的影响。4.研究U50, 488H对低氧下培养的PASMCs增殖的影响。5.研究U50, 488H对低氧下肺动脉重建的影响。方法1. Western-blot法检测正常大鼠肺动脉上是否存在κ-OR,及其蛋白表达量与心脏、肺、腹主动脉上κ-OR蛋白表达对比情况。2.采用动物低压舱模拟海拔50005500米高度气压环境（大气压50kPa,氧浓度约10%）,建立低压低氧性肺动脉高压模型。3.用微导管自右颈外静脉插管至右心室及肺动脉,测定平均肺动脉压（mPAP）及右心室压力（RVP）等肺血流动力学指标;称量大鼠右心室（RV）和左心室（LV）加室间隔（S）重量,以RV/（LV+S）比值和RV/BW（体重）比值反映右心室肥厚程度。4. Western-blot及免疫荧光法检测低氧对大鼠肺动脉上κ-OR表达的影响。5. Western-blot及免疫荧光法检测U50, 488H对低氧下大鼠肺动脉κ-OR表达的影响。6.免疫荧光法检测PASMCs上κ-OR表达,及低氧对其表达的影响;观察U50, 488H对低氧下培养的PASMCs上的κ-OR表达的影响。7.用四氮唑蓝（MTT）比色法和3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法观察U50,488H对低氧状态下培养的PASMC增殖的影响。8. HE染色及弹力纤维染色法,观察U50, 488H对低氧下肺小动脉形态学的影响。结果1.大鼠肺动脉上有κ-OR的表达,并且κ-OR主要分布在大鼠肺动脉平滑肌层。2.大鼠慢性低氧1w后已形成肺动脉高压（PAH）。mPAP及RVP明显升高,RV/（LV+S）比值和RV/BW比值均显着增加。3.低氧可上调大鼠肺动脉上κ-OR的表达,腹腔注射κ-OR特异性激动剂U50, 488H （腹腔隔日注射1.25 mg/kg/day）可进一步上调低氧下的κ-OR的表达,而这一效应可被κ-OR特异性阻断剂nor-BNI （2.00mg/kg/day）所阻断。4.低氧（1224h）可上调肺动脉平滑肌细胞上的κ-OR的表达,U50,488H （100μmol/L）可明显上调低氧（24h）下的肺动脉平滑肌细胞上的κ-OR的表达。5. U50,488H明显降低低氧状态下培养的大鼠PASMC的MTT OD值与3H-TdR掺入量。该效应呈现出明显的剂量依赖性（10100μmol/L）,并可被nor-BNI所阻断。6.光镜观察U50,488H预防组大鼠肺小动脉管壁增厚、平滑肌增生、迁移等病理改变明显减轻。结论1.肺动脉存在κ-OR的表达,并且主要分布在平滑肌细胞核内。2.低氧可上调大鼠肺动脉及平滑肌细胞上κ-OR蛋白的表达,而这一效应可被特异性激动剂U50,488H加强。3.以上实验证明激动κ-OR可抑制肺动脉平滑肌细胞增殖和抑制肺动脉重建,为进一步研究κ-OR介导的治疗肺动脉高压提供了潜在的治疗策略。
二、U50,488H对大鼠腹主动脉的舒张作用及其机制（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、U50,488H对大鼠腹主动脉的舒张作用及其机制（论文提纲范文）
（1）激活κ阿片受体改善高脂血症大鼠血管内皮功能的作用及其机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 激活Κ-OR对高脂血症大鼠血管内皮结构和功能的作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 激活Κ-OR改善血管内皮功能 的机制 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（2）激动κ阿片受体对大鼠高原性肺水肿的防治作用及相关机理研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1 高原性肺水肿 |
| 2 阿片受体 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物的选择 |
| 1.2 主要使用器材及试剂 |
| 1.3 主要液体的配置 |
| 2 方法 |
| 2.1 高原性肺水肿模型的制备 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 实验标本采集及相关指标检测方法 |
| 2.4 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 高原性肺水肿大鼠 mPAP 和肺含水量的比较 |
| 3.2 高原性肺水肿大鼠肺组织病理形态学改变的影响 |
| 3.3 高原性肺水肿大鼠肺组织 iNOS，NO 的变化 |
| 3.4 高原性肺水肿大鼠肺组织和血清 MDA、SOD 水平的影响 |
| 3.5 高原性肺水肿大鼠肺组织 ET-1 和血清 EPO 水平的影响 |
| 3.6 高原性肺水肿大鼠肺组织 TXB2、6-Keto-PGF1 及其对比值的影响 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（3）κ-阿片受体在低氧性肺动脉高压中的作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 κ-OR 介导的抗低氧性肺动脉高压作用 |
| 1 目的 |
| 2 材料 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 试剂 |
| 2.3 仪器 |
| 2.4 液体配制 |
| 3 方法 |
| 3.1 实验动物分组及处理 |
| 3.2 低氧性肺动脉高压大鼠模型的建立 |
| 3.3 大鼠肺血流动力学及右心室肥厚等指标的测定 |
| 3.4 Western-blot 法检测蛋白变化 |
| 3.5 强啡肽水平的检测 |
| 3.6 统计学处理 |
| 4 结果 |
| 4.1 低氧对肺血流动力学指标的影响 |
| 4.2 U50,488H 对低氧性肺动脉高压大鼠血流动力学指标的影响 |
| 4.3 U50,488H 对低氧性肺动脉高压大鼠心肌肥厚指标的影响 |
| 4.4 U50,488H 对肺动脉κOR 表达的影响 |
| 4.5 低氧时内源性κ-OR 激动剂强啡肽水平的变化 |
| 5 讨论 |
| 第二部分 κ-阿片受体介导的肺血管舒张作用 |
| 1 目的 |
| 2 材料 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 试剂 |
| 2.3 仪器 |
| 2.4 液体配制 |
| 3 方法 |
| 3.1 离体肺动脉血管环张力测定 |
| 3.2 统计学处理 |
| 4 结果 |
| 4.1 U50,488H 对低氧性肺动脉高压大鼠肺血管的舒张作用 |
| 4.2 NO 合成酶抑制剂对κOR 介导的舒血管效应的影响 |
| 5 讨论 |
| 第三部分 κ–OR 介导的抗肺动脉平滑肌细胞增殖作用 |
| 1 目的 |
| 2 材料 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 试剂 |
| 2.3 仪器 |
| 2.4 液体配制 |
| 3 方法 |
| 3.1 PASMC 原代细胞的培养 |
| 3.2 大鼠 PASMCs 原代细胞的鉴定 |
| 3.3 ~3H－TdR 掺入实验和细胞 MTT 活性检测 |
| 3.4 统计学处理 |
| 4 结果 |
| 4.1 低氧对 PASMCs 增殖的影响 |
| 4.2 U50,488H 对低氧诱导的 PASMC 增殖作用的影响 |
| 5 讨论 |
| 第四部分 κ-OR 介导的内皮细胞保护作用 |
| 1 目的 |
| 2 材料 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 试剂 |
| 2.3 仪器 |
| 2.4 液体配制 |
| 3 方法 |
| 3.1 离体肺动脉血管环张力测定实验检测肺动脉内皮功能 |
| 3.2 大鼠血清 NO 含量的测定 |
| 3.3 PMVECs 的培养 |
| 3.4 细胞凋亡检测（TUNEL法） |
| 3.5 肺动脉上 Akt 和 eNOS 磷酸化水平的测定 |
| 3.6 统计学处理 |
| 4 结果 |
| 4.1 U50,488H 对 ACh、SNP 介导的血管舒张反应的影响 |
| 4.2 U50,488H 对 HPH 大鼠血清 NO 水平的影响 |
| 4.3 U50,488H 对低氧条件下肺微血管内皮细胞 NO 生成的影响 |
| 4.4 U50,488H 抗低氧引起的 PMVECs 凋亡的作用 |
| 4.5 U50,488H 对 PMVECs 的 Akt 和 eNOS 磷酸化水平的影响 |
| 5 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（4）κ-阿片受体激动剂防治低氧性肺动脉高压的研究进展与展望（论文提纲范文）
| 1 肺动脉高压 |
| 2 阿片肽与HPH |
| 2.1 U50、488H对正常及HPH大鼠离体肺动脉的舒张作用及机制 |
| 2.2 U50、488H对大鼠肺循环的影响及对HPH的防治作用 |
| 2.3 U50、488H对低氧诱导的内皮功能损伤的影响 |
| 2.4 U50、488H对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 |
| 3 结语及展望 |
（5）U50488H对低氧性肺动脉高压内皮功能的改善作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 U50488H对HPH大鼠内皮功能的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 HPH模型的建立 |
| 2.2 实验设计和分组 |
| 2.3 血流动力学测定 |
| 2.4 右室肥厚指数的测定 |
| 2.5 大鼠肺动脉内皮功能的测定 |
| 2.6 大鼠血清NO含量的测定 |
| 3 结果 |
| 3.1 U50488H对HPH大鼠RVP和RVHI的影响 |
| 3.2 U50488H处理增强HPH大鼠肺动脉对ACh的舒张反应 |
| 3.3 U50488H提高HPH大鼠血清NO水平 |
| 4 小结 |
| 第二部分 U50488H对NO生成的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 HPH模型的建立 |
| 2.2 肺动脉eNOS和iNOS活性的测定 |
| 2.3 肺动脉p-Akt、Akt、p-eNOS、eNOS和iNOS的表达水平测定 |
| 3 结果 |
| 3.1 U50488H升高HPH大鼠肺动脉eNOS活性并且降低iNOS活性 |
| 3.2 U50488H提高HPH大鼠肺动脉eNOS磷酸化水平，此作用不依赖于Akt的磷酸化 |
| 3.3 U50488H没有显着改变HPH大鼠肺动脉iNOS的表达水平 |
| 4 小结 |
| 第三部分 U50488H对NO破坏的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 HPH模型的建立 |
| 2.2 肺动脉总抗氧化活性(T-AOC)的测定 |
| 2.3 肺动脉gp91phox的表达 |
| 3 结果 |
| 3.1 U50488H升高HPH肺动脉总抗氧化活性 |
| 3.2 U50488H降低HPH大鼠肺动脉gp91phox的过表达 |
| 4 小结 |
| 第四部分 U50488H抗低氧引起的PMVECS凋亡 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 PMVECs的培养 |
| 2.2 细胞凋亡检测（TUNEL法） |
| 3 结果 |
| 3.1 U50488H抗低氧引起的PMVECs凋亡 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（6）κ-阿片肽与一氧化氮在低氧性肺动脉高压大鼠血管内皮功能中作用的研究进展（论文提纲范文）
| 1 NO途径参与HPH |
| 2 阿片肽及其受体参与舒血管、降压作用 |
| 3 阿片肽通过NO介导舒血管作用 |
（7）κ阿片受体在复苏大鼠心肌中的表达及其对心功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 详细摘要 |
| 英文缩略词 |
| 序言 |
| 第一部分复苏大鼠心功能及心肌中κ阿片受体的表达 |
| 一 前言 |
| 二 材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 三 结果 |
| (一) 一般参数 |
| (二) CA/CPR相关参数 |
| (三) 血流动力学参数 |
| (四) κ阿片受体在心肺复苏大鼠心肌中的表达 |
| 四 讨论 |
| 五 结论 |
| 第二部分不同停搏时间对复苏大鼠心功能及心肌中κ阿片受体表达的影响 |
| 一 前言 |
| 二 材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 三 结果 |
| (一) 一般参数 |
| (二) CA/CPR相关参数 |
| (三) 血流动力学参数 |
| (四) κ阿片受体在不同停跳时间复苏大鼠心肌中的表达 |
| 四 讨论 |
| 五 结论 |
| 第三部分参附对应用肾上腺素复苏大鼠心功能及心肌中κ阿片受体表达的影响 |
| 一 前言 |
| 二 材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 三 结果 |
| (一) 一般参数 |
| (二) CA/CPR相关参数 |
| (三) 血流动力学参数 |
| (四) κ阿片受体在不同心肺复苏药物大鼠心肌中的表达 |
| 四 讨论 |
| 五 结论 |
| 第四部分κ阿片受体激动剂对大鼠离体心脏缺血再灌注后心功能的保护作用 |
| 一 前言 |
| 二 材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 三 结果 |
| (一) 一般参数 |
| (二) 复苏结果 |
| (三) 血流动力学参数 |
| (四) 缺血/再灌注后室性心律失常的发生频率 |
| 四 讨论 |
| 五 结论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 附 发表的SCI论文全文 |
| 致谢 |
（8）к阿片受体通过抑制β肾上腺素受体途径调节Cx43发挥抗心律失常的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1 阿片肽与心血管系统 |
| 2 缝隙连接与心血管系统 |
| 正文 |
| 第一部分 κ阿片受体和β肾上腺素受体激动后对正常心肌组织C x 43 基因和蛋白的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 κ阿片受体和β肾上腺素受体激动后对缺血/再灌注心肌组织C x 43 基因和蛋白及对心律失常发生率的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）κ阿片受体在糖尿病大鼠血管病变中的作用及其相关机制的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 κ阿片受体在糖尿病大鼠血管病变中的作用及其相关机制的研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（10）低氧时肺动脉上κ-阿片受体的变化及其抗增殖作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 低氧时肺动脉上Κ-阿片受体的变化及其抗增殖作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
四、U50,488H对大鼠腹主动脉的舒张作用及其机制（论文参考文献）
- [1]激活κ阿片受体改善高脂血症大鼠血管内皮功能的作用及其机制[D]. 田菲. 第四军医大学, 2017(05)
- [2]激动κ阿片受体对大鼠高原性肺水肿的防治作用及相关机理研究[D]. 罗斌. 第四军医大学, 2014(01)
- [3]κ-阿片受体在低氧性肺动脉高压中的作用[D]. 张丽君. 第四军医大学, 2013(02)
- [4]κ-阿片受体激动剂防治低氧性肺动脉高压的研究进展与展望[J]. 裴建明,李娟. 西安交通大学学报(医学版), 2012(05)
- [5]U50488H对低氧性肺动脉高压内皮功能的改善作用及其机制研究[D]. 时全星. 第四军医大学, 2012(02)
- [6]κ-阿片肽与一氧化氮在低氧性肺动脉高压大鼠血管内皮功能中作用的研究进展[J]. 李书凯,李娟,孙新,翟蒙恩,时歆,张丙芳,裴建明. 心脏杂志, 2011(04)
- [7]κ阿片受体在复苏大鼠心肌中的表达及其对心功能的影响[D]. 单怡. 第二军医大学, 2010(10)
- [8]к阿片受体通过抑制β肾上腺素受体途径调节Cx43发挥抗心律失常的作用及机制研究[D]. 王伟光. 第四军医大学, 2010(06)
- [9]κ阿片受体在糖尿病大鼠血管病变中的作用及其相关机制的研究[D]. 周萱. 第四军医大学, 2010(06)
- [10]低氧时肺动脉上κ-阿片受体的变化及其抗增殖作用[D]. 李娟. 第四军医大学, 2008(02)