羊膜移植对PRK术后早期创面愈合的影响

一、羊膜移植对PRK后早期伤口愈合的影响（论文文献综述）

郭秀瑾^[1]（2010）在《不同方式的准分子激光表面切削术后角膜创伤愈合反应的实验研究》文中提出随着准分子激光角膜屈光手术的发展,角膜表面切削术因为不存在角膜瓣相关并发症,扩大了近视手术的矫治范围以及术后成像质量高等优势而重新受到关注。然而,角膜上皮下雾状混浊（Haze）的发生是制约角膜表面屈光手术的一个重要因素。Haze是准分子激光角膜表面切削术后一定时间在角膜切削区出现的上皮及其下方基质的雾状混浊,是准分子激光角膜表面切削术后的主要并发症之一。不同的角膜表面切削方式术后Haze的发生率也不同。Haze不仅影响视力,还是造成屈光回退的主要原因。Haze的形成是一个复杂的角膜创伤愈合反应过程,由多种细胞和因子参与调控,是多种因素共同作用的结果。近年来,角膜表面屈光手术后Haze形成的机制及防治已成为屈光手术研究的热点。本研究通过建立机械法准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术（Epi-LASIK）、去瓣的Epi-LASIK（off-flap Epi-LASIK）和准分子激光屈光性角膜切削术（PRK）动物模型,旨在从病理组织学角度和分子生物学水平,比较不同方式的准分子激光角膜表面切削术后角膜创伤的愈合反应和Haze产生的差异,来探讨Haze形成的机制,为临床上准分子激光治疗屈光不正的术式选择和Haze的防治提供理论依据。第一部分兔Epi-LASIK、去瓣的Epi-LASIK和PRK术后早期角膜创伤愈合反应的对比研究目的:通过比较兔Epi-LASIK , off-flap Epi-LASIK and PRK三种角膜表面切削术,探讨不同的手术方式及术后不同的角膜上皮愈合方式对早期角膜创伤愈合反应的影响。方法:健康新西兰白兔共50只（100只眼）,将其中48只（96只眼）随机分为Epi-LASIK , off-flap Epi-LASIK and PRK三个手术组,每组32只眼,另2只兔（4只眼）未手术眼作为正常对照组。3%戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉（1ml/kg体重）和0.5%爱尔卡因表面麻醉后,实验眼分别行Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三种角膜表面切削术,且每只兔的两只眼分别随机行不同的手术方式。Epi-LASIK术应用微型角膜上皮刀制作角膜上皮瓣,准分子激光切削后再将上皮瓣复位,覆盖在切削区上;off-flap Epi-LASIK术是用微型角膜上皮刀制作角膜上皮瓣,完成激光切削后,再将上皮瓣去除;PRK术用角膜上皮刮刀钝性机械去除角膜上皮,去除角膜上皮的直径为9.0mm,将上皮刮除干净后行激光切削。采用美国博士伦公司Technolas217型准分子激光治疗仪在实验眼均行-10.0D激光切削,切削深度120μm。分别在术后4小时、1天、3天和7天共四个时间点处死各组动物,取角膜进行如下实验观察:1.采用光镜、透射电子显微镜观察三种手术后角膜上皮的愈合方式。2.免疫组织化学方法检测角膜基质炎症细胞数量、角膜基质细胞凋亡数量以及白细胞介素-1（IL-1β）和增殖蛋白Ki-67在角膜基质的表达。结果:1我们通过光镜和透射电镜观察到三种手术术后角膜上皮的愈合方式有不同的特点:（1）Epi-LASIK术后4小时上皮大部分表层细胞水肿,有轻微损伤的表现,上皮与基质结合稍疏松;术后1天上皮瓣稍变薄,上皮表面微绒毛减少,小部分基底细胞水肿,提示上皮瓣活性尚可;术后3天可见上皮瓣水肿;术后7天上皮水肿消退,基本恢复正常结构,但上皮层数较前增多,约7-9层,上皮表面微绒毛正常。（2）off-flap Epi-LASIK术后4小时,角膜切削区基质表面无上皮;术后1天,有一层新生角膜上皮细胞覆盖切削区,以后新生的角膜上皮逐层增多,术后7天上皮层数约7-8层,结构恢复正常。（3）PRK组术后4小时,角膜切削区无上皮;术后1天,角膜切削区边缘可见单层上皮细胞向切削区延伸,切削区仍暴露部分裸露的基质床,以后新生的上皮逐渐覆盖切削区,层数增多,但上皮细胞排列较紊乱,术后7天,上皮约5-7层,上皮细胞排列稍紊乱,基底膜完整,上皮表面可见少量微绒毛。2角膜的愈合反应:（1）Epi-LASIKPRK、off-flap Epi-LASIK和PRK三种角膜表面切削术后4小时角膜浅基质层即可见炎性细胞浸润、凋亡的阳性细胞以及IL-1β和增殖蛋白Ki-67的表达;三组手术后1天角膜基质的炎性细胞数量和凋亡的细胞均最多,增殖蛋白Ki-67的表达均在术后3天达到高峰。（2）术后7天,Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK组未见炎性细胞,PRK组偶见炎性细胞,三组角膜基质中均仅有少量TUNEL阳性细胞,IL-1β和Ki-67的表达均开始降低。（3）PRK组术后4小时、1天、3天和7天四个时间点上述各项指标均显着高于Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK组,组间两两比较差异均具有统计学意义（P<0.05）;而Epi-LASIK组术后各时间点的炎性细胞数、凋亡的阳性细胞数以及IL-1β和增殖蛋白Ki-67的表达又均比off-flap Epi-LASIK组多,其中炎性细胞数和凋亡的阳性细胞数于术后1天和3天组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）,IL-1β和Ki-67的表达在术后1天、3天和7天组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三种角膜表面切削术由于术中不同的上皮处理方式及术后不同的上皮愈合方式引起术后早期角膜创伤愈合反应程度的差异,其中off-flap Epi-LASIK的反应程度最轻,提示off-flap Epi-LASIK可能在减轻角膜表面切削术的术后早期刺激症状和远期Haze发生率方面具有一定的优势。第二部分兔Epi-LASIK、去瓣的Epi-LASIK和PRK术后Haze形成的对比研究目的:探讨Epi-LASIK , off-flap Epi-LASIK and PRK三种角膜表面切削术后在Haze发生发展方面存在的差异及成因。方法:健康新西兰白兔共47只（94只眼）,将其中45只（90只眼）随机分为Epi-LASIK , off-flap Epi-LASIK and PRK三个手术组,每组30只眼,另2只兔（4只眼）未手术眼作为正常对照组。3%戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉（1ml/kg体重）和0.5%爱尔卡因表面麻醉后,实验眼分别行Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三种角膜表面切削术,且每只兔的两只眼分别随机行不同的手术方式。Epi-LASIK术应用微型角膜上皮刀制作角膜上皮瓣,准分子激光切削后再将上皮瓣复位,覆盖在切削区上;off-flap Epi-LASIK术是用微型角膜上皮刀制作角膜上皮瓣,完成激光切削后,再将上皮瓣去除;PRK术用角膜上皮刮刀钝性机械去除角膜上皮,去除角膜上皮的直径为9.0mm,将上皮刮除干净后行激光切削。采用美国博士伦公司Technolas217型准分子激光治疗仪在实验眼均行-10.0D激光切削,切削深度120μm。三种角膜表面切削术后,进行如下实验观察:1、定期在裂隙灯显微镜下观察角膜上皮的愈合情况并记录每个手术组兔角膜上皮的愈合时间及进行Haze的分级评估。2、分别于术后1周、1个月和3个月共三个时间点处死各组动物,取角膜。通过透射电镜对兔术后不同时间点角膜的组织结构进行观察;采用免疫组织化学、免疫印迹法（Western Blot法）等检测方法测定与Haze形成密切相关的指标α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅲ型胶原在角膜中的表达。结果: 1角膜上皮愈合时间:Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK术后兔眼平均角膜上皮愈合时间分别为4.1±1.0,3.8±0.8和4.4±1.2天,三个手术组组间两两比较差异均无统计学意义（F=0.88,P>0.05）。2角膜Haze情况:（1）术后1个月,Epi-LASIK组Haze的发生率为40%（0.5级Haze 6眼,1级Haze 2眼）;off-flap Epi-LASIK组为35%（0.5级Haze 5眼,1级Haze 2眼）;PRK组为80%（0.5级Haze 8眼,1级Haze 5眼）。PRK与Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK两组比较差异均有统计学意义（p<0.05）;Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK两组间比较差异没有统计学意义（p>0.05）。（2）术后3个月,Epi-LASIK组Haze的发生率为30%（0.5级Haze 3眼）;off-flap Epi-LASIK组为30%（0.5级Haze 2眼,1级Haze 1眼）;PRK组为60%（0.5级Haze 4眼,1级Haze 2眼）。三组间两两比较差异均无统计学意义（p>0.05）。3、透射电子显微镜观察:（1）术后1个月,Epi-LASIK,off-flap Epi-LASIK和PRK三组角膜上皮的结构基本正常,角膜浅基质成纤维细胞明显增多、形态和排列不规则、细胞核变大、核仁明显、常染色质和粗面内质网丰富,新陈代谢旺盛,新生的胶原明显增多且排列紊乱。三组中PRK的程度较重,Epi-LASIK与off-flap Epi-LASIK两组比较未发现明显差异。（2）术后3个月,三个手术组角膜浅基质内成纤维细胞数量均开始减少、形态及排列较前规则,胶原排列仍稍紊乱,PRK组的程度比Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK两组稍重,且胶原纤维较粗大。4、免疫组织化学及免疫印迹法检测角膜中α-SMA的表达:Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三组术后1周角膜中α-SMA的表达开始增多,术后1个月角膜α-SMA的表达均达到高峰。三组术后在1周、1个月和3个月角膜中α-SMA的表达均为PRK>Epi-LASIK> off-flap Epi-LASIK,三组与对照组以及三个时间点的组间两两比较差异均有统计学意义（p<0.05）。5、免疫组织化学及免疫印迹法检测角膜中Ⅲ型胶原的表达:Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三组术后1周角膜中Ⅲ型胶原的表达明显增多,并均于术后1个月达到高峰,三组术后在1周、1个月和3个月角膜中Ⅲ型胶原的表达均为PRK>Epi-LASIK>off-flap Epi-LASIK,三组与对照组以及三个时间点的组间两两比较差异均有统计学意义（p<0.05）。结论:Epi-LASIK手术中上皮瓣的保留对促进术后角膜上皮的愈合、减少Haze形成没有明显的意义,角膜表面切削术中尽量减少对角膜上皮的损伤,是防治术后Haze形成的关键因素。off-flap Epi-LASIK与Epi-LASIK和PRK比较,术后角膜上皮愈合快、Haze反应轻,有望成为临床上优先选择的角膜表面屈光手术方式。第三部分兔Epi-LASIK、去瓣的Epi-LASIK和PRK术后角膜中TGF-β1和CTGF的表达及其对Haze形成的影响目的:通过观察Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三种角膜表面切削术后角膜中转化生长因子-β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）的表达情况,探讨两者之间的关系及其对术后Haze发生发展的影响。方法:健康新西兰白兔共47只（94只眼）,将其中45只（90只眼）随机分为Epi-LASIK , off-flap Epi-LASIK and PRK三个手术组,每组30只眼,另2只兔（4只眼）未手术眼作为正常对照组。3%戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉（1ml/kg体重）和0.5%爱尔卡因表面麻醉后,实验眼分别行Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK三种角膜表面切削术,且每只兔的两只眼分别随机行不同的手术方式。采用美国博士伦公司Technolas217型准分子激光治疗仪在实验眼均行-10.0D激光切削,切削深度120μm。分别于术后1周、1个月和3个月共三个时间点处死各组动物取角膜,采用免疫组织化学和免疫印迹法（Western Blot法）检测Haze形成过程中的两个主要调控因子TGF-β1和CTGF在三种手术后角膜中的表达情况。结果:1免疫组织化学及免疫印迹法检测角膜中TGF-β1的表达:正常对照组角膜中TGF-β1的表达非常低弱。Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK术后1周TGF-β1的表达明显增强,术后1个月达高峰,术后3个月仍有较强表达,其中PRK组在术后1周、1个月和3个月三个时间点TGF-β1的表达均明显高于Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK组,Epi-LASIK组又稍高于off-flap Epi-LASIK组,三组与对照组以及三个时间点的组间两两比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。2免疫组织化学及免疫印迹法检测角膜中CTGF的表达:Epi-LASIK、off-flap Epi-LASIK和PRK术后1周CTGF的表达开始升高,均在术后1个月表达最强,术后3个月仍有较高表达,其中PRK组在术后1周、1个月和3个月三个时间点CTGF的表达均明显高于Epi-LASIK和off-flap Epi-LASIK组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;Epi-LASIK组在术后三个时间点CTGF的表达又稍高于off-flap Epi-LASIK组,术后1周两组比较差异无统计学意义（P>0.05）,术后1个月、3个月比较差异具有统计学意义（P<0.05）;三组与对照组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:TGF-β1和CTGF介导了角膜表面切削术后角膜创伤的愈合反应,在愈合反应过程中具有协同作用,与Haze的发生发展关系密切。off-flap Epi-LASIK术后各时间点角膜中TGF-β1和CTGF的表达明显低于Epi-LASIK和PRK,差异均具有统计学意义（P<0.05）,提示off-flap Epi-LASIK在减少术后Haze形成方面较Epi-LASIK,特别是PRK具有明显优势。

杜娟^[2]（2008）在《羊膜提取液对兔准分子激光术后haze的影响机制》文中研究表明目的探讨羊膜提取液（amniotic extraction, AE）对准分子激光屈光性角膜切削术（photorefractive keratectomy, PRK）后伤口愈合过程的影响及减轻PRK术后角膜上皮下雾状混浊（haze）的作用机制。方法健康无眼疾的27只新西兰大白兔（54只眼）,采用完全随机分组设计方案,随机分为三组（实验组、激素组与空白组）,每组9只兔（18只眼）。制造PRK动物模型（PTK模式下去除兔角膜上皮,PRK治疗模式下按-10D、6.5mm切削直径进行角膜切削）。术后实验组滴用AE,激素组用0.1%磷酸地塞米松眼液,空白组用不含AE的赋形剂,术后每天观察眼部大体情况。于1、4、8W处死每组3只实验兔,取双眼角膜组织,采用光镜观察角膜切削区中央上皮的恢复情况,免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth musclea actin,α-SMA）、CD11b,原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）检测角膜基质细胞的凋亡,并进行统计学分析。结果1、术后1W,光学显微镜下见,三组的角膜上皮细胞均已完全覆盖激光切削面,上皮基底细胞大小不均,上皮细胞层间排列极不规则,基质浅层有较多角膜基质细胞积聚。术后4W,激素组和空白对照组基质浅层内较多新生胶原,排列不规则,失去板层结构,瘢痕形成。术后8W,三组角膜上皮仍未恢复至正常,角膜激素组和空白组基质浅层见大量新生胶原纤维,排列极不规则（图1-4）。2、术后1、4、8W CD11b在三组均未见明显阳性细胞表达。三组比较无统计学差异。3、术后1W TUNEL阳性细胞在三组均有表达,AE组较空白对照组、激素组的阳性细胞明显减少;术后4W TUNEL阳性细胞在空白对照组有表达,AE组、激素组未见明显的阳性细胞表达（p<0.01）。术后8W三组均未见明显凋亡阳性细胞的表达。4、术后1、4、8Wα-SMA在空白对照组、激素组的角膜基质浅层均有阳性表达,且术后4W阳性表达的细胞数目较1W增高;术后8W较4W的阳性细胞数目减少。术后1、4、8Wα-SMA在AE组的表达均为阴性（p<0.01）。结论AE可以减少PRK术后haze的产生。其机制可能为AE能够减少细胞凋亡,减少肌成纤维细胞的产生与聚集从而减少胶原与瘢痕形成。

张斌^[3]（2008）在《自制羊膜提取液在兔眼准分子激光屈光性角膜切削术后应用的实验研究》文中研究表明目的:讨论自制羊膜提取液对兔眼准分子激光屈光性角膜切削（PRK）术后角膜雾状混浊（haze）的影响。方法:常规方法获取新鲜健康人羊膜,保留上皮细胞,反复冻融、过滤,获得羊膜匀浆液,室温下保存备用。选择健康新西兰大白兔27只,在相同条件下,双眼行PRK手术,术后实验动物完全随机分为羊膜提取液组（实验组）、激素组（对照组）、不含羊膜提取液的赋形剂组（空白组）,每组9只兔,18只眼。术后双眼给予局部抗生素眼药水,术后48h实验组滴用羊膜提取液,对照组用0.1%磷酸地塞米松眼液,空白组用不含羊膜提取液的赋形剂。术后每日进行临床观察,并分别于术后第1、2、4、8周记录角膜haze情况并按Fantes等级标准进行评分,行眼前节照相记录haze的形态,进行统计学分析。随机每组选择3只兔作为病理观察用,分别于术后第1、4、8周各处死一只,摘除眼球做病理切片检查,观察术区角膜、炎症细胞及成纤维细胞情况。结果:PRK术后早期,3组动物角膜荧光素钠染色均为阳性,但多数角膜上皮缺损均在术后3d修复,且羊膜组角膜上皮愈合速度较其他两组要快。PRK术后haze的发生率为100%,所有术眼均在术后一周左右开始出现程度不同的haze,术后三、四周时haze尤其明显,直至术后8周。羊膜提取液组和激素组角膜haze形成程度相似,且明显低于空白组haze形成程度,有显着性差异（p<0.05）。结论:羊膜提取液具有促进兔角膜上皮修复的作用,并能减少PRK术后兔角膜上皮下雾状混浊（haze）。

朱娟娟^[4]（2008）在《84例感染性角膜溃疡的临床分析》文中研究说明目的:分析感染性角膜溃疡的病因,发病特点及各种治疗方法。对预防感染性角膜溃疡失明提供科学依据。方法:收集我院1995年3月——2007年8月感染性角膜溃疡病例84例（91眼）,进行回顾性分析,分析感染性角膜溃疡的病因,发病特点及各种治疗方法。结果:在84例（91眼）感染性角膜溃疡中:细菌性角膜溃疡48眼（52.74%）;病毒性角膜溃疡26眼（28.57%）,真菌性角膜溃疡4眼（4.40%）,其它（未确定病原体类型）13眼（14.29%）。男性50人（59.52%）,女性34人（40.48%）。农牧民（含从事与农业相关工作者）工人47人（55.95%）,退休人员15人（17.86%）,干部14人（16.67%）,其他职业8人（9.52%）。24人（28.57%）发病前有角膜外伤史, 13人（15.48%）发病前有明显感冒史,5人（5.95%）戴隐形眼镜后发病,42人无明显诱因（50%）。65眼（71.43%）经针对病因药物治疗,35眼（53.85%）视力得到提高。26眼（28.57%）手术治疗。其中行角膜移植术7眼（穿透性角膜移植术4眼,板层角膜移植术3眼）,7眼均治愈（100%）,6眼视力提高;行结膜遮盖术5眼,治愈1眼（20%）,4眼好转。行羊膜移植术5眼,治愈1眼（20%）、视力得到提高,4眼好转。7眼行眼内容物剜除术,2眼行眼球摘除术,均为残愈。结论:感染性角膜溃疡危害极大,是常见的致盲眼病。应重在预防、早期诊断、正规治疗。积极有效的治疗手段对于挽救患者的视功能是非常重要的。

陈媛^[5]（2007）在《羊膜提取液对兔准分子激光术后角膜上皮下混浊及泪液质量的影响》文中认为目的探讨羊膜提取液对PRK术后泪膜质量、伤口愈合过程的影响及其作用机制,以期探索出减轻PRK术后角膜上皮下混浊（Haze）及干眼产生的新途径。方法采用健康无眼疾的新西兰大白兔18只共36只眼,在相同条件下,采用德国视明公司生产的第五代准分子激光治疗仪（Multiscan准分子激光治疗仪）制造PRK动物模型（PTK模式下去除兔角膜上皮,PRK治疗模式下按-10D、6.5mm切削直径进行角膜切削）。术后实验动物完全随机分为实验组、对照组、空白组,每组6只兔,12只眼。其中实验组滴用羊膜提取液,对照组用0.1%磷酸地塞米松眼液,空白组用不含羊膜提取液的赋形剂,术后每天观察眼部大体情况。在术后1周、4周及8周,在裂隙灯显微镜下观察所有实验兔Haze的产生情况,按Fantes分级进行评分,行眼前节照相记录haze的形态,进行统计学分析。之后每组处死2只实验兔,取双眼角膜行光镜检查,在光镜下对术后三组1、4、8周兔眼测量角膜切削区中央上皮增生厚度,并进行统计学分析;对角膜切片作胶原染色,观察角膜基质中胶原增殖程度。同时,术前及术后1、4、8周对实验兔行角膜荧光素钠染色、泪液羊齿状试验、结膜杯状细胞数量观察以评价泪液形态学变化。结果PRK术后早期,3组动物角膜荧光素钠染色均为阳性,但多数角膜上皮缺损均在术后4～6d修复,且羊膜组角膜上皮愈合速度较其他两组要快。术后一周,在光学显微镜下,三组角膜上皮细胞均已完全覆盖激光切削面,新生的角膜上皮细胞层数多,基底层上皮细胞大小不一。术后4周,三组覆盖切削区的角膜上皮细胞仍有轻度增生,空白组前基质层内较多新生胶原,排列不规则,失去板层结构,瘢痕形成。术后8周,三组角膜上皮仍未恢复至正常厚度,空白组前基质见大量新生胶原纤维,排列极不规则。羊膜提取液组激光切削区中央的角膜上皮细胞增生厚度小于激素组和空白组,有显着性差异（p<0.05）。所有术眼均在术后一周左右开始出现程度不同的haze,术后三、四周时haze尤其明显,直至术后8周。羊膜提取液组角膜haze形成程度明显低于激素组和空白组,有显着性差异（p<0.05）。术后4、8周,泪液羊齿状试验结果、结膜杯状细胞数量在羊膜组较空白组有显着改变,有统计学差异（p<0.05）。术后4周,较激素组有差异（p<0.05）。术后1周,三组间没有差异。结论本实验表明,准分子激光屈光性角膜切削术后滴用羊膜提取液是安全有效的,它能减轻术后的角膜伤口愈合反应,有效减轻术后haze的形成。其机制可能为羊膜提取液中包含羊膜的有效成分,可渗入到角膜组织中,并通过角膜细胞因子的相互作用,影响到上皮的愈合,并在上皮基质的相互作用下,减少胶原增生、瘢痕形成,完成角膜基质的重塑过程。同时,羊膜提取液对准分子激光术后泪液形态及泪膜功能的恢复产生积极的作用。

张慧卿^[6]（2007）在《5％高渗盐水和20％酒精对LASEK角膜上皮影响的比较研究》文中进行了进一步梳理目的：评价用5％高渗盐水制作角膜上皮瓣的准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术（LASEK）的有效性和安全性，并从组织病理学和细胞生物学方面比较5％高渗盐水和20％酒精对角膜上皮细胞活性的影响。方法：对84例中低度近视患者（168眼）随机取一眼行20％酒精制作角膜上皮瓣的LASEK术（A-LASEK），另一眼行5％高渗盐水制作角膜上皮瓣的LASEK术（HS-LASEK）。术眼分别在20％酒精或5％高渗盐水浸泡25秒，松解角膜上皮，在制作上皮瓣前先沿瓣缘标记内侧刮取少量角膜上皮片（1mm×3mm大小），随机取21例（42眼）的角膜上皮片用台盼蓝排斥法观察细胞存活率，21例（42眼）立即浸入装有培养液的无菌瓶中于30分钟内行细胞培养，21例（42眼）石蜡包埋，行HE染色，光镜下组织学观察。其余21例（42眼）做正常对照组，于浸泡前刮取角膜上皮行光镜观察及细胞培养。术后观察角膜上皮修复时间及裸眼视力、屈光度及角膜上皮下雾状混浊（Haze）情况，随访时间为6月。结果：正常角膜上皮细胞排列整齐致密，细胞无染色。20％酒精和5％高渗盐水浸泡25秒后的角膜上皮细胞存活率分别为（74.47±1.13）％、（89.15±1.27）％，差异有统计学意义。光镜组织学观察可见：酒精浸泡的角膜上皮细胞，表层上皮轻度水肿，基底细胞体积增大；高渗盐水处理的角膜上皮表层细胞未见异常，基底细胞轻度脱水。20％酒精及5％高渗盐水浸泡的角膜上皮细胞行细胞培养后能正常贴壁伸展，说明浸泡后的角膜上皮具有生物学活性。术后HS-LASEK眼上皮修复时间约为（3.65±0.28）天，A-LASEK眼上皮修复时间约为（4.29±0.57）天，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；术后3天裸眼视力达到0.8者A-LASEK中有22眼（26.2％），HS-LASEK中有40眼（47.6％）；术后1天A-LASEK者有21眼（25.0％）有明显的疼痛；HS-LASEK仅有10眼（11.9％）有明显疼痛（P＜0.05）。结论：高渗盐水制作的上皮瓣细胞活性高于酒精组，临床观察结果也表明术后患者角膜反应较轻，角膜上皮修复快，术后视力两组无显着差异。高渗盐水制作角膜上皮瓣的LASEK术是一种安全有效、预测性好的屈光手术。

陈丽华,江萍^[7]（2006）在《LASEK术后Haze的防治研究进展》文中指出准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术（LASEK）后角膜上皮下雾状混浊（Haze）的形成主要是凋亡机制介导的角膜创伤愈合过程。通过局部应用皮质类固醇药物、非甾体抗炎药物等来减弱创伤愈合反应,以及应用锌制剂、细胞因子调控等来阻断角膜细胞凋亡,可以预防和治疗Haze的形成,提高LASEK的稳定性和预测性。

栗印兰^[8]（2006）在《硅胶与羊膜植入对青光眼滤过术后碱性成纤维细胞生长因子表达的影响》文中指出目的:利用动物实验,探讨硅胶、羊膜对青光眼滤过术后滤过区瘢痕形成的影响,并应用免疫组织化学的方法,检测小梁切除联合硅胶、羊膜植入术后硅胶、羊膜影响滤过区碱性成纤维细胞生长因子（Beta-Fibroblastic Growth Factor,bFGF）表达的阳性细胞情况,来推测硅胶、羊膜对影响青光眼滤过术后滤过区瘢痕形成的作用机理,同时可以对二者的疗效进行对比。方法:选取健康新西兰白色塔兔24只（48眼）,雌雄兼备,体重1.5-2.5kg,应用随机区组设计方法,依据不同时间（第3、5、7、14天）将动物随机分为4个区组,每组6只（12眼）,每一区组中有4个处理组,每个处理组3眼,4个处理组分别于全麻下施行小梁切除术联合羊膜植入（A）、小梁切除术联合硅胶植入（B）、小梁切除术联合丝裂霉素C（MMC）（C）、单纯小梁切除术（D）,其中,A、B为两个实验组,C组作为阳性对照组,D组作为空白对照组;观察手术前及手术后第1、2、3、5、7、14天眼压变化情况和手术后第3、5、7、14天滤过泡形成情况。并对不同处理组于手术后第3、5、7、14天处死实验兔摘除眼球,切取手术区8mm×8mm范围组织,应用石蜡切片的免疫组织化学方法染色技术,观察手术后第3、5、7、14天滤过区组织内bFGF所表达的阳性细胞及阳性物质情况,同时对每一组滤过区组织均做H-E染色,常规光学显微镜下观察成纤维细胞形成情况。综合观察结果,判断羊膜与硅胶对滤过区瘢痕形成的影响。结果: D组在第3天就可以在滤过区看到有大量bFGF表达的阳性细胞及bFGF物质的表达,光镜下见到少量成纤维细胞增殖,在第5天逐渐增多,到第7天达到高峰,成纤维细胞增殖亦增多,到第14天所

毛平安,马雅玲^[9]（2006）在《准分子激光术后角膜上皮下雾状混浊的研究进展》文中指出本文就准分子激光屈光性角膜切削术（PRK）后的主要并发症角膜上皮下雾状混浊（haze）的形成机制和治疗的研究现状作一简要综述,以帮助广大眼科工作者更好的认识和防治haze,从而提高PRK手术的预测性和安全性。

李钫^[10]（2005）在《羊膜移植对单疱病毒性角膜炎中MMP-9及TIMP-1的表达影响》文中提出目的:研究Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）所致的单疱病毒性角膜炎行羊膜移植后基质金属蛋白酶（MMP-9）及其抑制剂（TIMP-1）在小鼠角膜中的表达,探讨羊膜移植后单纯疱疹病毒性角膜炎中MMP-9及TIMP-1的表达变化与角膜基质炎病程变化的关系。 方法:将40只雌性Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组20只,每只均取右眼为实验眼。将5μl含有1×105pfu HSV-1病毒的DMEM点于两组小鼠右眼划伤角膜表面建立单纯疱疹病毒性角膜炎模型,对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术;对照组不行羊膜移植。在羊膜移植术后2、7、14d处死动物,用免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测两组小鼠MMP-9及TIMP-1在角膜中的分布及其平均光度值。 结果:对照组20只鼠眼中17只发生单纯疱疹性角膜基质炎;羊膜移植组仅有9只鼠眼发生角膜基质炎;两组角膜基质炎发生率差异有显着性意义（P<0.01）。羊膜移植组角膜上皮病变程度、混浊程度和新生血管明显低于对照组（P<0.05）。羊膜移植组临床评分显示各时间点角膜上皮病变、角膜混浊和新生血管明显低于对照组。免疫组织化学染色显示对照组角膜中MMP-9在第2天出现表达,第14天达高峰。TIMP-1开始表达不明显,第7天出现表达,14天达高峰。羊膜移植组各时间点MMP-9表达低于对照组,而TIMP-1表达高于对照组。 结论:羊膜移植术可能通过调节基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达平衡,从而抑制和延迟HSV-1感染后单纯疱疹病毒性角膜炎的发生和发展。

二、羊膜移植对PRK后早期伤口愈合的影响（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、羊膜移植对PRK后早期伤口愈合的影响（论文提纲范文）

（1）不同方式的准分子激光表面切削术后角膜创伤愈合反应的实验研究（论文提纲范文）

（2）羊膜提取液对兔准分子激光术后haze的影响机制（论文提纲范文）

（3）自制羊膜提取液在兔眼准分子激光屈光性角膜切削术后应用的实验研究（论文提纲范文）

（4）84例感染性角膜溃疡的临床分析（论文提纲范文）

（5）羊膜提取液对兔准分子激光术后角膜上皮下混浊及泪液质量的影响（论文提纲范文）

（6）5％高渗盐水和20％酒精对LASEK角膜上皮影响的比较研究（论文提纲范文）

（7）LASEK术后Haze的防治研究进展（论文提纲范文）

（8）硅胶与羊膜植入对青光眼滤过术后碱性成纤维细胞生长因子表达的影响（论文提纲范文）

（9）准分子激光术后角膜上皮下雾状混浊的研究进展（论文提纲范文）

（10）羊膜移植对单疱病毒性角膜炎中MMP-9及TIMP-1的表达影响（论文提纲范文）

四、羊膜移植对PRK后早期伤口愈合的影响（论文参考文献）

• [1]不同方式的准分子激光表面切削术后角膜创伤愈合反应的实验研究[D]. 郭秀瑾. 河北医科大学, 2010(01)
• [2]羊膜提取液对兔准分子激光术后haze的影响机制[D]. 杜娟. 南华大学, 2008(02)
• [3]自制羊膜提取液在兔眼准分子激光屈光性角膜切削术后应用的实验研究[D]. 张斌. 大连医科大学, 2008(02)
• [4]84例感染性角膜溃疡的临床分析[D]. 朱娟娟. 新疆医科大学, 2008(02)
• [5]羊膜提取液对兔准分子激光术后角膜上皮下混浊及泪液质量的影响[D]. 陈媛. 南华大学, 2007(01)
• [6]5％高渗盐水和20％酒精对LASEK角膜上皮影响的比较研究[D]. 张慧卿. 山东大学, 2007(03)
• [7]LASEK术后Haze的防治研究进展[J]. 陈丽华,江萍. 国际眼科杂志, 2006(05)
• [8]硅胶与羊膜植入对青光眼滤过术后碱性成纤维细胞生长因子表达的影响[D]. 栗印兰. 大连医科大学, 2006(11)
• [9]准分子激光术后角膜上皮下雾状混浊的研究进展[J]. 毛平安,马雅玲. 医学综述, 2006(07)
• [10]羊膜移植对单疱病毒性角膜炎中MMP-9及TIMP-1的表达影响[D]. 李钫. 武汉大学, 2005(05)

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